20世纪90年代，科学家们发现一类非经典的内含子剪接序列，一种全新的剪接体开始进入科学家的视野。
在随后的研究中，科学家们逐渐确定了这个全新剪接体的核酸组成，其中U11、U12、U4atac、U6atac四种新的snRNA参与该类内含子的识别与剪接。由于这种非经典的内含子占比不足1%，该类内含子被称作稀有内含子（或U12依赖型内含子），催化该类内含子剪接的这种全新剪接体被命名为——次要剪接体。
“尽管由次要剪接体进行剪接的稀有内含子含量极低，但是这些基因却与许多重要的细胞基本生命活动密切相关。”万蕊雪说，许多人类疾病与次要剪接体和稀有内含子有关，例如生长激素缺乏症、小脑共济失调、骨髓增生异常综合征等。然而，对于U12依赖型内含子以及次要剪接体的研究却发展缓慢，次要剪接体的蛋白组成、重塑调控等关键的科学问题，一直没有答案。其中非常重要的一步——如何捕获并纯化次要剪接体，是相关研究面临的一个巨大难题。
首次建立完整的次要剪接体捕获与纯化方法
“在没有任何次要剪接体的捕获与纯化等相关文献的情况下，摸索并建立次要剪接体的捕获与纯化方法迫在眉睫。”白蕊说。
施一公研究组的白蕊与万蕊雪长期从事剪接体的纯化与结构研究工作，积累了大量剪接体结构研究的经验。
在研究经验基础之上，结合次要剪接体识别位点的特异性，研究组首次设计出一条全新的U12依赖型pre－mRNA。通过改良前人的体外剪接反应实验条件，成功地确定了该U12依赖型的pre－mRNA具有极高的特异性与剪接的高效性。
“由于次要剪接体的含量极低，如何进一步获得性质良好的次要剪接体样品，成为了本次研究的一大难点。”白蕊说。 |
